La serie describe las hazañas de los hermanos Sam y Dean Winchester, quienes viajan a diversos sitios de Estados Unidos, a bordo de un Chevrolet Impala de color negro y modelo 1967, investigando y combatiendo sucesos paranormales e inexplicables, muchos de ellos basados en leyendas urbanas de la cultura estadounidense, además de criaturas sobrenaturales clásicas, tales como vampiros, licántropos y fantasmas. A lo largo de las siguientes temporadas, la trama se ha diversificado, a consecuencia principalmente del desarrollo de los protagonistas y su relación con eventos como el Apocalipsis.
En algunos flashbacks se cambia ligeramente el guión de los episodios.
En la primera temporada a los shapeshifters los llaman "transformistas", en la segunda "mimetistas" y en la cuarta "transformadores".
La palabra "Then" al inicio de cada episodio en traducida como Antes aunque en algunos episodios de la octava temporada es traducida como Después.
En el episodio 22 de la quinta temporada Lucifer llama a Sam joven Skywalker en referencia al Anakin Skywalker de Star Wars, irónicamente Irwin Daayán quien dobla a Sam, es la voz de Anakin en las últimas películas y series animadas de la franquicia.
Juan Carlos Tinoco dejó el doblaje de la serie después de la primera mitad de la octava temporada, por lo que luego Irwin Daayán pasó a interpretarlos hasta la temporada 11. Sin embargo, se mantuvo el archivo de la voz de Tinoco para cuando dice las frases Antes y Ahora durante las recapitulaciones y el título de la serie en los siguientes episodios. Ya desde el episodio 170 todo es dicho por Daayán.'
A partir de la temporada 12, Irwin Daayán dejó de doblar a Sam Winchester debido a su renuncia de Grupo Macías. Luego de hacer pruebas de voz, el estudio eligió a Carlos Hernández para el personaje y grabó los 5 primeros episodios, pero por cuestiones de horarios tuvo que dejar el personaje y el cliente eligió a Armando Guerrero como la voz definitiva de Sam y regrabó los episodios grabados por Carlos. Cuando la temporada estrenó en Warner, los episodios 242 y 243 fueron estrenados con los diálogos grabados por Carlos aunque con algunos loops con la voz de Armando. Sin embargo, en Netflix se escucha la voz de Guerrero en toda la temporada.
Meses después de empezar la temporada 12, Armando Coria también renunció al estudio, siendo sustituido por Guillermo Rojas con el personaje de Dean Winchesster y por Adrián Fogarty en la dirección. Warner estrenó todos los episodios doblados por Coria mientras que en Netflix hay cuentas en las que los tres primeros episodios de la temporada aparecen regrabados por Rojas, mientras que en otra su voz se escucha en toda la temporada.
