Harley Quinn fue creada por Paul Dini y Bruce timm para Batman: La serie animada. Fue tanta su popularidad que pasó a ser parte del universo de DC. Su primera aparición fue en el capítulo "A favor del guasón".
Su verdadero nombre Harleen Frances Quinzel, eterna enamorada de El Guasón y enemiga de Batman. El mismo Guasón propuso cambiar su nombre a Harley Quinn, que es un juego de palabras que forman "arlequin".
Su primera aparición fue en 1992 en el episodio 22 de la serie de "Batman", y el origen definitivo del personaje fue escrito en el cómic "The Batman Adventures: Mad Love" en 1994. Harley se caracteriza por usar en traje a Arlequin o Bufón, que también sirvió de adaptación en un capítulo de la serie snimada del mismo nombre.
Harleen Quinzel se destaco en su época escolar por ser una gran gimnasta, la cuál le permitió tener una beca para estudiar Psiquiatría en la Universidad de Gotham. Fue así como empezó a trabajar en Arkham y quedó fascinada con un recluso en especial, el Guason. Luego de rogar por tres meses para tratarlo, lo logra. El Guasón logró seducirla y hacer que se enamore perdidamente de el. En una de las fugas del Guason, Batman lo regresó todo ensangrentado y con varios golpes y es allí donde Harleen se transforma y jura matar a Batman. Roba un traje de arlequin y varios elementos de una casa de risas y se dispone a sacar al Guasón de Arkham y desde ese momento pasa a ser la villana Harley Quinn.
Aparte de el Guasón, se ha afiliado con Hiedra Venenosa, Gatúbela, El escuadrón suicida y LG anarkia.